一:
双向电泳技术百科
问题1:双向凝胶电泳的操作步骤
答:聚焦是一个与pH相关的平衡过程:蛋白质以不同的速率靠近并最终停留在它们各自的pI值;在等电聚焦过程中,蛋白质可以从各个方向移动到它的恒定位点。SDS.聚丙烯酰胺凝胶电泳双向电泳的第二向是将IPG胶条中经过第一向分离。
问题2:蛋白双向电泳分析的主要技术难点有哪些
答:蛋白双向电泳是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳,然后再进行SDS-PAGE,经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。蛋白双向电泳分析的主要技术难点是高分辨率和重复性。高分辨率确保蛋白最大程度的分离。
问题3:双向电泳和wb的区别
答:sds-page是sds聚丙烯酰胺电泳实验,单纯只是电泳。WB指通过抗体特异性杂交目的蛋白质显影的实验。一般作wb之前需要做sds-page把蛋白按质量大小跑开,之后转膜杂抗体。但sds-page之后可以不接wb,直接把胶染考马斯亮蓝看蛋白。
问题4:想求教一下生物知识,关于差异凝胶双向电泳(DIGE)的原理及应用谁能介绍
答:差异凝胶双向电泳(DIGE)是用于检测蛋白表达中真实的生物学差异并对差异进行定量的方法。它结合了蛋白组学研究中经典的双向电泳技术和特有的多重荧光分析技术。楼主可以到生物帮那里找这方面的文章,我看到过一篇DIGE的技术原理以。
问题5:如何处理双向电泳的样本
答:双向电泳技术发展迅速,目前是蛋白质组学中应用最广泛的蛋白质分离手段。样本制备方法对于获得清晰度高的电泳结果至关重要,然而最佳的样本制备方法需要考虑样本特点及研究目的。你是如何处理双向电泳样本的?分享一下你在双向电泳。
问题6:双向电泳第二步SDS-PAGE跑胶的问题
答:1,提取蛋白的时候要充分超声粉碎,然后高速离心。吸取上清的时候不要触到沉淀。污染不一定是RNA和DNA,还有可能是胶里面有杂质。2遇热膨胀过度,你可以在电泳槽里面安放冰槽,电泳液预先降温,同时降低电泳时的电流。
问题7:电泳的作用是什么
双向电泳答:聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于蛋白质定量,电泳后的凝胶经凝胶扫描仪扫描,从而给出定量的结果,凝胶扫描仪主要用于对样品单向电泳后的区带和双向电泳后的斑点进行扫描。
问题8:双向电泳的送样要求
答:1、样品新鲜。说明:组织样本及细胞采样后应立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂,运输过程中血液、血清样品4℃保存,其它样品-20℃保存,不超过48小时(若外地邮寄,除血液、血清及细胞外请用干冰)。2、样品蛋白的总量不。
问题9:2DE和MS技术是什么
答:2DE是双向电泳技术,也叫二维电泳技术。MS技术指质谱(mass-spectrograph)技术。二者都是研究蛋白质以及蛋白质组学的常用技术。
问题10:蛋白质类混合物适合用什么方法分析
双向电泳答:氨基酸混合物特别是寡聚核苷酸混合物一次电泳往往不能完全分开。这种情况可以将第一次电泳分开的斑点通过支持介质间的接触印迹转移到第二个支持介质上,旋转90°,进行第二次电泳。这种方法称为双向电泳。2、聚丙烯酰胺凝胶电泳。
二:
双向电泳技术资料
问题1:蛋白质双向电泳的基本原理和主要用途。这是一道问答题,拜托请帮我详细
双向电泳答:蛋白质2维电泳1个方向是SDS-聚丙烯酰胺凝胶主要是把蛋白质按照分子量分开1个方向是等点聚焦把蛋白质按照等电点的不同分开这样就可以把不同的蛋白质尽可能的分开有些蛋白分子量相近,但是等电点不同。而等电点。
问题2:为什么使用2*sds制备蛋白样
双向电泳答:蛋白质样品的制备主要包括分离和纯化两大步骤前者是从生物体中提取出蛋白质,后者是提纯某一种目标蛋白1蛋白质带有电荷,是两性分子,因此能够在电场中运动,因此能够电泳2双向电泳中的第一向(等电聚焦)利用了蛋白质在。
问题3:在制备双向电泳的蛋白样品时,为什么要谨慎使用sds
答:双向电泳样品制备要想得到良好的双向电泳结果,适当的样品sds绝对重要。双向电泳实验蛋白质样品制备要点双向电泳是一种分析从细胞、组织或其他生物样本中提取的蛋白质混合物的有力手段,是蛋白质组学研究中的一种常用技术。蛋白。
问题4:双向电泳中使用的SB3-10以及CA是什么东西?
答:3、溶解方法要保证样品在电泳过程中保持溶解状态。增加样品溶解性的手段变性剂:通过改变溶液中的氢键结构使蛋白质充分伸展,将其疏水中心完全暴露,降低接近疏水残基的能量域。其典型代表是尿素和硫尿。表面活性剂:经过变性剂。
问题5:双向电泳技术中有哪种方法有助于提高蛋白质间分辨率?
双向电泳答:双向电泳是等电聚焦电泳和SDS-PAGE电泳的组合也就是说蛋白质既按照等电点排列(等电聚焦)又按照分子量排列(SDS-PAGE)因此提高了对蛋白质的分辨率。
问题6:电泳法分离混合蛋白质的基本原理是什么?
答:氨基酸混合物特别是寡聚核苷酸混合物一次电泳往往不能完全分开。这种情况可以将第一次电泳分开的斑点通过支持介质间的接触印迹转移到第二个支持介质上,旋转90°,进行第二次电泳。这种方法称为双向电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳:以。
问题7:双向电泳为什么先进行等电聚焦再进行SDSPAGE?
答:SDSPAGE是根据蛋白分子量差异进行分离。SDSPAGE进行时,SDS会使蛋白质变性,成为大小相似的棒锥状;也会使蛋白表面携带大量的负电(带电量与表面积有关),也就是说所有蛋白都是带负电的且带电量相近,用等电聚焦无法分离。
问题8:双向电泳和WESTERNBLOTTING是属同一个实验吗?可不可以用双向电泳的胶
答:2D电泳和WESTERNBLOTTING不是一个实验。但他们都有蛋白质电泳。WESTERNBLOTTING还有抗体。双向电泳的胶条不能做WESTERN,但是如果把胶条二次横向电泳到胶片,然后再转到膜上,就可以做WESTERN了。
问题9:双向电泳实验中为何灌了一晚上的胶都没凝?
答:影响凝胶的,一般是APS(过硫酸铵)和DEMED但相对来说DEMED比较难失活,一般不凝胶80%都出在APS上,APS在水溶液里面一般都不是非常稳定,非常容易失效所以建议你重新配置一个10%APS试试另外,高温也会导致固体的APS失效。
问题10:双向电泳之后的染色方法有几种?EB,考染,还有ECL染色等等各自的优缺点能
答:由于各种染色方法灵敏度的不同并且不同类型的蛋白质对不同的染色方法有特异性,所以各种染色方法都有优缺点。银染或者荧光染色的灵敏度相对考染来说要高:且荧光染色可不使核酸显示,背景低(高信噪比),质谱匹配,需与能。
三 :